液相色譜儀有氣泡怎么解決 液相色譜儀常見故障解決方法

一、液相色譜儀有氣泡怎么解決

液相色譜儀作為一種高精密儀器，在使用過程中會遇見很多問題，比如出現了氣泡，那么液相色譜儀有氣泡怎么解決呢？

觀察氣泡所在的位置！

1、如果是泵前，那么擰開排氣閥，清除掉就可以了。

2、如果走到儀器管路里面，卸下色譜柱，用異丙醇低流速沖洗過夜。

3、如果走到柱子里面比較麻煩，反相柱子走純甲醇，進口處放低，出口處抬，讓氣泡出來，也是低流速過夜，出口好別接檢測器，用一根peek管接到廢液瓶里面就可以了。

二、液相色譜儀常見故障解決方法

1、故障1：壓力波動大，流量不穩定

（1）原因分析：

系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使兩者不能密封。

（2）解決方法：

工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸入空氣，流動相要充分脫氣。若單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯中用超聲波清洗。

2、故障2：自檢時，出現“燈能量低”的錯誤

（1）原因分析：

一般來說是由于系統中有擋光物，光路偏離，氘燈電源系統或氘燈燈泡已壞。

（2）解決方法：

首先要檢查光度室是否有擋光物；打開檢測器光源室蓋，檢查氘燈是否點亮，如果氘燈不亮，則關機，更換新氘燈，換氘燈時，需注意型號；檢查氘燈保險絲，看是否松動、氧化、燒斷，如果氘燈保險絲出現故障，應立即更換；再開機重新自檢，若仍出現上述故障，則重新安裝軟件后再進行自檢。

3、故障3：出峰不準，峰分叉

（1）原因分析：

造成這種情況的原因一般是色譜柱被污染，或柱頭填料塌陷。

（2）解決方法：

對于第1種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇 異丙醇（4 6）沖洗柱子（沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定），再換成甲醇沖洗，然后，再用純水沖洗，最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30min以上。

對于第2種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結或塌陷，去除硬結部分（污染的填料），裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填平，用與內徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30min以上。

4、故障4：柱壓升高

（1）原因分析：

造成柱壓升高的原因一般是由于緩沖液鹽份如乙酸銨等，沉積柱內，或樣品污染沉積，造成流體阻力加大所致。

（2）解決方法：

對于第1種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應的提高流速沖洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30min。

對于第2種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇 異丙醇（4 6）沖洗柱子（沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定），再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，最后用甲醇正向沖洗柱子30min以上。

5、故障5：峰面積重復性不佳

（1）原因分析：

主要原因有進樣閥漏液；加樣針不到位或液量不足。

（2）解決方法：

對于第1種情況更換進樣墊圈；對于第2種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩地從LOAD狀態轉換到INJECT狀態，以保證進樣量的準確。

6、故障6：流動相內有氣泡

（1）原因分析：

流動相內不斷有氣泡溢出，關閉泵，打開排空閥，按PURGE鍵清洗脫氣，氣泡不斷的從過濾器冒出，進入流動相，無論打開PURGE鍵幾次，都無法清除不斷產生的氣泡。主要是因為過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內，過濾器內部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。

（2）解決方法：

過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗15min即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36h，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開PURGE鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡從過濾器中冒出，說明過濾器內部的霉菌菌團已被硝酸破壞，流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調至1.0～3.0mL/min，純水沖洗過濾器1h左右。即可將過濾器清洗干凈。關閉泄壓閥，純甲醇沖洗0.5h即可。

7、故障7：基線漂移

（1）原因分析：

一般說來，機器剛起動時，基線容易漂移，大概要半個小時的平衡時間，如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽，或在低波長下（220nm）平衡時間相對會比較長，但如果在實驗過程中發現基線漂移，則你要考慮下面的原因：①柱溫波動；②流通池被污染或有氣體；③紫外燈能量不足；④流動相污染、變質或由低品質溶劑配成；⑤樣品中有強保留的物質以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現出一個逐步升高的基線；⑥檢測器沒有設定在最大吸收波長處；⑦流動相的pH值沒有調節好。

（2）解決方法：

①控制好柱子和流動相的溫度，檢查是否有打開的窗戶或空調對著柱溫箱；②用甲醇或其他強極性溶劑沖洗流通池（最好斷開柱子）。如有需要，可以用1N的硝酸（不要用鹽酸）；③更換新的紫外燈；④檢查流動相的組成，使用高品質的化學試劑及HPLC級的溶劑；⑤使用保護柱，如有必要，在分析過程中，定期用強溶劑沖洗柱子；⑥將波長調整至最大吸收波長處；⑦加適量的酸或堿調至最佳pH值。

8、故障8：保留時間漂移

（1）原因分析：

保留時間重現是液相性能好壞的一個重要標志，同一種樣品，兩次的保留時間相差不要超過15s，超過了30s可看做保留時間漂移，就無法進行定性，須要考慮以下原因：①溫控不當；②流動相比例變化；③色譜柱沒有平衡；④流速變化；⑤泵中有氣泡。

（2）解決方法：

①調好柱溫，檢查是否有打開的窗戶或空調對著柱溫箱；②檢查泵的比例閥是否有故障；③在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱；④重新設定流速；⑤從泵中除去氣泡。

9、故障9：靈敏度不夠

（1）原因分析：

造成這種情況主要有以下原因：①樣品量不足；②樣品未從柱子中流出；③樣品與檢測器不匹配；④檢測器衰減太多；⑤檢測器時間常數太大；⑥檢測器池窗污染；⑦檢測池中有氣泡；⑧記錄儀測壓范圍不當；⑨流動相流量不合適；⑩檢測器與記錄儀超出校準曲線。

（2）解決方法：

①增加樣品量；②可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子；③根據樣品化學性質調整波長或該換檢測器；④調整檢測器衰減；⑤降低時間參數；⑥清洗檢測器池窗；⑦排出檢測池中的氣泡；⑧調整電壓范圍；⑨調整流動相流量；⑩檢查記錄儀與檢測器，重作校準曲線。

10、故障10：基線噪音

（1）原因分析：

規則的基線噪音產生的原因主要有①在流動相、檢測器或泵中有空氣（尖銳峰）；②漏液；③流動相混合不完全；④溫度影響（柱溫過高，檢測器為加熱）；⑤在同一條線上有其它電子設備（偶然噪聲）；⑥泵振動。

不規則的基線噪音產生的原因主要有①漏液；②流動相污染、變質或由低質溶劑配成；③流動相個溶劑不相溶；④檢測器或記錄儀電子元件故障；⑤系統內有氣泡；⑥檢測器內有氣泡；⑦流通池污染（即使是極少的污染物也會產生噪音）；⑧檢測器燈能量不足；⑨色譜柱填料流失或阻塞；⑩流動相混合不均勻或混合器不能正常工作。

（2）解決方法：

規則的基線噪音解決方法：①流動相脫氣，沖洗系統以除去檢測器或泵中的空氣；②檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音，如有必要更換泵密封；③用手搖動使混合均勻或使用粘度低的溶劑；④減小溫度差異，或增加熱交換器；⑤斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，并加以更正，采用精密級穩壓電源；⑥在系統中加入脈沖阻尼器。

不規則的基線噪音解決方法：①檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要更換密封，檢查流通池是否漏液；②檢查流動相的組成；③選擇互溶的流動相；④斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正；⑤用強極性溶液清洗系統；⑥清洗檢測器，在檢測器后面安裝背景壓力調節器；⑦用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池；⑧更換檢測器燈；⑨更換色譜柱；⑩維修或更換混合器，在流動相不走梯度時，建議不使用泵的混合裝置。